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      川芎嗪對巨噬源性泡沫細胞形成的抑制作用研究

      -- 川芎嗪對巨噬源性泡沫細胞形成的抑制作用研究

      文章來源:期刊 作者:于 妍 發布時間:2018年05月24日 點擊數:639 字號:
      目前,心腦血管疾病的發病率、復發率、致殘率及病死率均很高,而動脈粥樣硬化(Atherosclerosis,AS)是這類疾病的共同病理基礎。在AS斑塊中,巨噬細胞由于攝取了過多的膽固醇而形成泡沫細胞,這類巨噬源性泡沫細胞是AS斑塊形成和發展過程中的主要細胞類型,也是AS早期特征[1]。中醫理論認為AS 的發生與痰濁、血瘀密切相關[2]。川芎嗪是活血化瘀中藥川芎中提取的生物堿,是川芎主要有效成分之一,在抗
      AS 方面具有顯著作用[3]。本試驗以人急性單核細胞白血病細胞株1(THP-1)為研究對象,觀察巨噬源性泡沫細胞形成中細胞內膽固醇含量及酰基輔酶A-膽固醇酰基轉移酶1(ACAT-1)表達的變化情況,并在此基礎上給予川芎嗪干預,初步探討川芎嗪在巨噬源性泡沫細胞形成過程中的調節作用及其可能的機制。
      1 材料
      1.1 儀器
      SVE -4A1 型超凈工作臺(新加坡 Esco 公司);HERAcell150i型CO2細胞培養箱(美國Thermo公司);Biofuge 28RS型低溫高速離心機(德國Heraeus公司);4000B型倒置相差顯微鏡及成像系統(德國Leica公司);Clinicbio128C型酶標儀(澳大利亞Asys Hitech公司);GeneAmp 2400型聚合酶鏈反應PCR)系統(美國Perkin Elme公司);Mx3000P/3005P型實時熒光定量聚合酶鏈反應(RT-PCR)儀(美國gilent公司);DY-CZ-25E型電泳儀、轉膜儀、電泳槽(北京六一儀器廠)。
      1.2 藥品與試劑血管緊張素Ⅱ(AngⅡ,美國Sigma公司,批號:A9525);佛波酯(PMA,美國Sigma 公司,批號:P1585);氧化低密度脂蛋
      摘 要 目的:研究川芎嗪對巨噬源性泡沫細胞形成的抑制作用及其可能的作用機制。方法:將人急性單核細胞白血病細胞株1(THP-1)與160 nmol/L佛波酯(PMA)孵育24 h,使之分化為巨噬細胞;再將巨噬細胞與80 mg/L氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)培養液孵育24 h,使之向泡沫細胞轉化;再將上述細胞隨機分為空白對照(ox-LDL)組、模型(AngⅡ)組、陽性對照(纈沙坦)組和川芎嗪低、中、高濃度(質量濃度分別為0.025、0.05、0.1 g/L)組,各組細胞分別與80 mg/Lox-LDL培養液孵育48 h后,采用油紅O 染色觀察巨噬源性泡沫細胞轉化率,酶化學法測定細胞內膽固醇含量,實時熒光定量聚合酶鏈反應(RT-PCR)法和Western blot法分別檢測酰基輔酶A-膽固醇酰基轉移酶1(ACAT-1)mRNA、蛋白的表達。結果:與空白對照組比較,模型組巨噬源性泡沫細胞轉化率升高,細胞內膽固醇含量增加,ACAT-1 mRNA、蛋白的表達均增強,差異有統計學意義(P<0.01或P<0.05);與模型組比較,陽性對照組與川芎嗪低、中、高濃度組泡沫細胞轉化率降低,細胞內膽固醇含量減少,ACAT-1 mRNA、蛋白的表達減弱,差異有統計學意義(P<0.01或P<0.05)。結論:川芎嗪可抑制巨噬細胞分化為泡沫細胞。其可能的作用機制為通過抑制ACAT-1的表達、降低細胞內膽固醇含量,從而減少巨噬源性泡沫細胞形成。
      關鍵詞 川芎嗪;巨噬源性泡沫細胞;血管緊張素Ⅱ;酰基輔酶A-膽固醇酰基轉移酶1
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